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ELISA试剂盒标本的稀释标准
  • 发布日期:2020-01-17      浏览次数:13
    •    在做ELISA实验的时候,所采集的标本大多都需要稀释后才能用来做实验。有的ELISA试剂盒里说明书上有写标本的稀释比例,这样您就可以直接通过比例进行稀释,由于没有经验可寻,造成新用户出现无从下手的感觉,今天厂家就带你去细细的了解下。
        ELISA试剂盒标本的稀释标准:
        首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。zui后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
        标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300pg/ml,150pg/ml,75pg/ml,37.5pg/ml,18.5pg/ml,9pg/ml,4.5pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml,临用前15分钟内配制。
        如配制150pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
        生物素标记抗体的稀释原则:
        临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
        辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
        临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
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